Cell biology assays

Proteins

细胞生物学实验

蛋白质

编 者：Geri Kreitzer

Fanny Jaulin

Cedric Espenel

　

出 版 社：ELSEVIER

索 书 号：Q51/C393/2010/Y

藏书地点：武大外教中心

细胞生物学是以细胞为研究对象，从细胞的整体水平、亚显微水平、分子水平等三个层次，以动态的观点， 研究细胞和细胞器的结构和功能、细胞的生活史和各种生命活动规律的学科。细胞生物学是现代生命科学的前沿分支学科之一，主要是从细胞的不同结构层次来研究细胞的生命活动的基本规律。从生命结构层次看，细胞生物学位于分子生物学与发育生物学之间，同它们相互衔接，互相渗透。细胞生物学的发展总是依赖于技术和实验手段的进步,所以学习细胞生物学的技术和方法至关重要。蛋白质是生物体内最重要的生物大分子之一，因此蛋白质的研究和技术是生命科学研究领域中至关重要的一部分。蛋白质科学研究成果将催生一系列新的生物技术，带动医药、农业和绿色产业的发展，引领未来生物经济。蛋白质研究方法正经历着不断地更新，新的技术也不断地涌现，学习和掌握蛋白质研究的相关技术理论和方法，对于了解生命科学研究的前沿，对于研究课题的设计、实施和先进研究方法的应用都是十分必要的。

本书共分为五大部分，三十六章。第一部分的内容是标记和检测蛋白质，主要包括蛋白质判定、磷酸肽作图的基本步骤、蛋白质和多肽的放射性碘化、通过银染的电泳检测蛋白质及和质谱联用的步骤、利用SYPRO染色的电泳的蛋白质荧光检测、放射自显影和荧光六个章节的内容。第二部分的内容是基于蛋白质分离的蛋白质组分析，包含了自由流电泳、基于凝胶的蛋白质组学、用于蛋白质组分析的固定pH值梯度的高分辨率双向电泳、双向差异凝胶电泳、显像分析和定量、翻译后修饰的蛋白质在体内的同位素标记的凝胶分析六个章节。第三部分阐述的是蛋白质和蛋白质及蛋白质和小分子的相互作用，非变性条件下蛋白质免疫沉淀、用于研究蛋白质相互作用的非变性的聚丙烯酰胺凝胶电泳、通过化学交联分析蛋白质之间相互作用、过氧化物酶体定位可以作为研究蛋白质相互作用的工具、分析生物分子相互作用的质谱技术、配体印记法、模块化规模的酵母双杂交大规模筛选、用于生物特异相互作用的亲和电泳、蛋白质泛素化方法等多个章节内容都得到了详细的介绍。第四部分的内容是蛋白质和DNA的相互作用，主要就凝胶迁移实验、DNA转录因子的亲和层析——寡核苷酸捕获方法两个方面进行了介绍。第五部分介绍的对象是蛋白质和蛋白质修饰鉴定的质谱技术。涵盖了对通过质谱鉴定蛋白质和蛋白质测序、用于基质辅助激光解吸/电离质谱的蛋白质组样品准备方法、用于质谱的蛋白质点凝胶内消化、串联质谱多肽测序、利用多肽的串联质谱直接搜索数据库、通过质谱鉴定蛋白质磷酸化位点、基于非凝胶的蛋白质组学等多个章节内容的详细介绍。

本书是一本蛋白质研究实验方法的工具书。内容包括标记和检测蛋白质、基于蛋白质分离的蛋白质组分析、蛋白质和蛋白质及蛋白质和小分子的相互作用、蛋白质和DNA相互作用、蛋白质性质和蛋白质修饰鉴定的质谱技术等。本书介绍了这些方法的基本原理，重点在于每种方法的操作过程和经验总结，指出成败的关键、可能出现的问题及解决的方法。书后附有蛋白质研究的各种常用数据表。本书可供生物化学、分子生物学、生物技术、医药卫生以及农、林、牧等方面有关的科研、教学与技术人员参考。

本书目录

前言

贡献者名单

第一部分：标记和检测蛋白质

第一章 蛋白质判定

第二章 磷酸肽作图：基本步骤

第三章 蛋白质和多肽的放射性碘化

第四章 通过银染的电泳检测蛋白质：和质谱联用的步骤

第五章 利用SYPRO染色的电泳的蛋白质荧光检测

第六章 放射自显影和荧光：以薄膜为基础的用于平板样品中放射性成像的技术

第二部分：基于蛋白质分离的蛋白质组分析

第七章 自由流电泳

第八章 基于凝胶的蛋白质组学：高分辨率的蛋白质双向电泳，等电聚焦和非平衡pH值梯度电泳

第九章 用于蛋白质组分析的固定pH值梯度的高分辨率双向电泳

第十章 双向差异凝胶电泳：蛋白质表达差异的分析在多种生物样品中的应用

第十一章 影像分析和定量

第十二章 翻译后修饰的蛋白质在体内的同位素标记的凝胶分析

第三部分：蛋白质和蛋白质及蛋白质和小分子的相互作用

第十三章 非变性条件下蛋白质免疫沉淀

第十四章 用于研究蛋白质相互作用的非变性的聚丙烯酰胺凝胶电泳：在线粒体氧化磷酸化复合体分析中的应用

第十五章 通过化学交联分析蛋白质之间相互作用

第十六章 过氧化物酶体定位可以作为研究蛋白质相互作用的工具

第十七章 分析生物分子相互作用的质谱技术

第十八章 配体印记法：探测Ca²⁺和晓得GTP结合蛋白

第十九章 模块化规模的酵母双杂交大规模筛选

第二十章 用于生物特异相互作用的亲和电泳：高分辨率的双向亲和电泳用于在小鼠血浆的单克隆抗体中分离半抗原特异的多克隆抗体

第二十一章 蛋白质泛素化方法

第四部分：蛋白质和DNA相互作用

第二十二章 凝胶迁移实验

第二十三章 DNA转录因子的亲和层析：寡核苷酸捕获方法

第五部分：蛋白质性质和蛋白质修饰鉴定的质谱技术

第二十四章 通过质谱鉴定蛋白质和蛋白质测序

第二十五章 用于基质辅助激光解吸/电离质谱的蛋白质组样品准备方法

第二十六章 用于质谱的蛋白质点凝胶内消化

第二十七章 串联质谱多肽测序

第二十八章 利用多肽的串联质谱直接搜索数据库

第二十九章 通过串联质谱和序列相似性数据库搜索工具鉴定基因组未测序的生物的蛋白质

第三十章 通过质谱鉴定蛋白质磷酸化位点

第三十一章 通过质谱对碳水化合物/糖蛋白的分析

第三十二章 细胞培养中氨基酸的稳定同位素标记用于定量蛋白质组学

第三十三章 在复杂的多肽混合物中半胱氨酰酞的位点特异的稳定同位素标记

第三十四章 电喷雾电离质谱测定蛋白质氢键交换

第三十五章 基于非凝胶的蛋白质组学：从复杂的多肽混合物中用选择性反向色谱分离包含蛋氨酸的多肽

第三十六章 质谱研究非共价蛋白质相互作用和蛋白质相似性

索引

（郑银珍）